黃草烏藥材非生物堿成分及其炮制前后對比研究

來源: www.411242.buzz 發布時間:2017-03-10 論文字數:27536字
論文編號: sb2017030711182816311 論文語言:中文 論文類型:碩士畢業論文
本論文是藥學論文,筆者對黃草烏藥材非生物堿化學成分進行研究,并對從分離得到的化合物在炮制前后的含量變化進行分析,為全面闡明黃草烏炮制原理奠定基礎。
引言
 
在我國,烏頭屬植物約36種可供藥用[3],具有抗炎,鎮痛、祛濕等作用[4]。烏頭始載于《神農本草經》,在中國使用了兩千多年,目前報道其主要有效成分和毒性成分均為二萜生物堿類[5];但其中的總生物堿含量不到1%[6],而含量超過99%的非生物堿類成分及其藥理活性研究很少?,F有的研究結果表明:某些非生物堿類成分與生物堿表現出相似的藥理活性:付雪艷等從鐵棒錘中制得非生物堿部位,經藥理研究表明,鐵棒錘非生物堿部位表現出良好的抗炎和鎮痛效果[7]。還有學者從烏頭屬植物的非生物堿部分分離得到了萜類、黃酮、多糖、蒽醌等類型化合物:內蒙古醫學院藥理學教研組草烏葉實驗小組的研究表明含酚性成分、糖、多糖、肌醇和鞣質,黃酮類成分[8]。黃草烏為毛茛科烏頭屬植物黃草烏(AconitumvilmorinianumKom)的干燥塊根[9],味苦,辛,麻,性溫,有劇毒[10],為云南習用草烏藥材品種[11]。目前對黃草烏研究也集中在生物堿部分,從中分離得到了黃草烏堿甲,黃草烏堿乙、vilmorrianneE、vilmorrianneF、滇烏堿等二萜生物堿[12-17],而非生物堿成分暫無研究報道。
臨床上黃草烏多炮制后入藥。黃草烏的炮制方法分為兩種:鮮黃草烏與甘草、黑豆、白礬、生姜煮制4-6小時而成的飲片;干黃草烏與甘草、黑豆、白礬、皂角先煮制3小時,再切片,八成干與甘草和生姜藥汁攪拌后,蒸制8-12小時而成的飲片[18]。課題組前期對黃草烏炮制前后成分進行了薄層分析,結果發現:黃草烏經炮制后總生物堿明顯減少,同時觀察到大量非生物堿物質的生成。在此基礎上對制黃草烏非生物堿成分進行了化學研究,從蒸煮法得到的制黃草烏飲片水溶性部位分離到甘草苷、蔗糖、甘草素、3,4-二甲氧基苯甲酸等[19];從其乙酸乙酯部位分離得到了正十六烷酸、酪氨酸、乙酸、7,4′二羥基黃酮、6-甲氧基二氫香豆素等[20];從其氯仿部位分離到β-胡蘿卜苷、β-谷甾醇乙酸酯和β-谷甾醇[21]。而這些非生物堿成分的來源并不清楚,同時它們在臨床藥效中起到的作用也不清楚。鑒于黃草烏藥材非生物堿成分尚未明確,本論文對黃草烏藥材非生物堿化學成分進行研究,并對從分離得到的化合物在炮制前后的含量變化進行分析,為全面闡明黃草烏炮制原理奠定基礎。
......
 
第一章黃草烏藥材非生物堿成分研究
 
本文通過硅膠、凝膠和MCI柱色譜及重結晶等方法對黃草烏藥材甲醇提取物氯仿萃取部位進行分離純化,從中分離得到了18個化合物,結合核磁共振譜、質譜、紅外光譜等,鑒定出了10個化合物,其中包含2個閉花木烷型二萜,即:(3R,5S,8R,9R,10S,14R)-3,17-dihydroxycleistantha-12,15-diene(1)、16,17-epoxy-3,15-dihydroxycleistantha-12-ene(2);四個含氮化合物Methyl-3-Hydroxy-4-(Benzoyl-amino)Benzoate(3)、菲啶-6(5H)-酮(Phenanthridin-6(5H)-one,4)、咔唑(carbazole,5)和對氨基肉桂酸甲酯(p-Aminocinnamicacidmethylester,6),兩個生物堿異塔拉定(isotalatizidine,7)和展花烏頭堿(chasmaconitine,8),以及1,3-雙棕櫚酸甘油酯(1,3-dipalmitin,9)和β-谷甾醇(β-sitosterol,10)。其中1的結構通過通MS、1D-NMR、2D-NMR和單晶衍射進行鑒定;2,3,4,5,6和9應用MS、1D-NMR、2D-NMR予以鑒定。其中化合物1、2和3為新化合物;化合物4,5,6,8和9均首次從該植物中分離得到。
 
1儀器與材料
1.1儀器設備
核磁共振譜用BrukerAM-400型超導核磁共振儀測定,以TMS為內標;質譜用BrukeramaZonSI型離子阱質譜儀測定;CF-1-10-123三用為上海精科實業有限公司;熔點用MP420全自動熔點儀測定;紅外光譜用TENSOR27/37紅外分析儀測定(德國布魯克光譜儀儀器公司);旋光度用JASCODIP-370高分辨率旋光光譜儀測定(JASCO日本分光公司)。
MCI-gelCHP-20為Witsubishi公司產品;柱層析用硅膠、薄層層析用硅膠G板和氧化鋁板均為青島海洋化工廠產品。
所用試劑,若無特殊說明均為工業級重蒸試劑。
顯色劑:改良碘化鉍鉀,碘,10%硫酸乙醇(加熱)。
......
 
2提取與分離
用氯仿萃取3次,合并萃取液,減壓干燥得浸膏。取氯仿部分浸膏754g,用硅膠柱分離劃段,依次用石油醚-丙酮(100:1—10:1)梯度洗脫,得7個流分A-G段。F段94g經硅膠柱色譜分離,用石油醚-丙酮系統梯度洗脫,得21個流分(F1—F21),F-12(10g)經MCI柱丙酮-水梯度洗脫,得化合物化合物4(20mg);F-12-5經凝膠和硅膠柱得到化合物9(100mg);F-15(19.4g)經MCI柱丙酮-水梯度洗脫,得化合物化合物1(100mg)和化合物2(40mg)和化合物6(370mg);F-15-18經過凝膠柱得到化合物14(50mg);F-12-24經過MCI和硅膠柱分離得到化合物15(20mg)和化合物16(100mg);E段(25g)經MCI柱丙酮-水梯度洗脫得27個流分,E-1得化合物3(40mg),E3得化合物5(30mg);E-21經硅膠柱分離得到化合物17(10mg)和化合物18(40mg);A段30g經硅膠色譜柱分離得到化合物7(300mg)和化合物10(20mg);C段10g經MCI柱丙酮-水梯度洗脫,C-5段經硅膠色譜柱分離得到化合物8(30mg),分離流程圖如下:

......

第三章 文獻綜述.....................................36
第一節 烏頭屬植物非生物堿研究現狀..................36
1 非生物堿類成分的化學研究..........................36
2 非生物堿成分的藥理研究...........................38
3 小結............................................40
參考文獻........................................... 41
第二節 閉花木烷型二萜的研究進展...................... 44
 
第二章黃草烏藥材非生物堿成分炮制前后對比分析
 
1儀器與材料
1.1儀器設備
高效液相色譜儀(Waters-2695):四元低壓梯度泵、自動進樣器、在線脫氣單元、UV檢測器、系統控制器、柱溫箱/帶制冷、WatersCLASS-VP色譜數據工作站;色譜柱:AgilentZorbaxPN-C18柱(4.6×250mm,5μm);電子天平(AUW1200,日本島津);電熱鼓風干燥箱DHG-9240A(上海恒科科學儀器有限公司);超聲儀(SG8200HPT,上海冠將)。
1.2實驗材料
實驗所用對照品為本文第一部分分離得到的單體化合物,即:(3R,5S,8R,9R,10S,14R)-3,17-dihydroxycleistantha-12,15-diene(1)、16,17-epoxy-3,15-dihydroxycleistantha-12-ene(2)、Methyl-3-Hydroxy-4-(Benzoyl-amino)–Benzoate(3)、菲啶-6(5H)-酮(Phenanthridin-6(5H)-one4)。經HPLC分析,純度依次為97.65%、76.01%、96.37%、88.68%。
實驗所用黃草烏鮮藥材購自云南省昆明市東川縣,經云南中醫學院中藥鑒定教研室楊樹德教授鑒定為毛茛科烏頭屬植物黃草烏(AconitumvilmorinianumKom)的新鮮塊根。黃草烏生藥材、煮制黃草烏、蒸煮制黃草烏均由本實驗室按照《云南省中藥飲片炮制規范》(1986年)中炙草烏炮制的方法炮制所得,另外炮制所需輔料甘草、黑豆、白礬、皂角、生姜均購自云南綠生藥業有限公司。
......
 
第三章文獻綜述
 
第一節烏頭屬植物非生物堿研究現狀
烏頭屬(Aconitum)植物為有毒植物,其有效成分和毒性成分均為含量較少的二萜生物堿[1]。目前對于烏頭屬藥材的研究也相對集中在生物堿部分,對于非生物堿部分的研究相對較少。下面對烏頭類藥材非生物堿成分的研究進行綜述。
1非生物堿類成分的化學研究
1.1黃酮類成分
FicoG從烏頭屬植物A.paniculatum的花的極性提取物中分離和鑒定了3種新的乙?;S酮醇苷,即山柰酚-3-O-β-(2"-乙?;?-吡喃半乳糖苷(1)、山柰酚-3-O-β-(2"-乙?;?-吡喃半乳糖苷-7-O-a-吡喃阿拉伯糖苷(2)和槲皮素-3-O-(2"-乙?;?-吡喃半乳糖苷-7-O-a-吡喃阿拉伯糖苷(3)[2]。
羅明等從甘青烏頭全草中分離的到了:山柰酚-3-O-[a-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-半乳糖苷]-7-O-a-L-鼠李糖苷、山柰酚-3-O-[a-L-鼠李糖基(1→6)-β-D-葡萄糖苷]-7-O-a-L-鼠李糖苷、山柰酚-7-O-a-L-鼠李糖苷[4]。
趙英永用水蒸氣蒸餾法提取草烏中揮發性成分,并采用氣質聯用方法分離鑒定了:O-鄰(丁氧羰基)苯甲酰羥基乙酸乙酯、棕櫚酸、7-乙烯基十六內酯、亞油酸甲酯、鄰苯二甲酸二丁酯、棕櫚酸甲酯、4-氨基聯苯、十一烯酸、十三烷酸乙酯、(順,順,順)-9,12,15-烯-l-醇[8]。
王銳等利用GC-MS從展毛多根烏頭(AKarakolicumvar.patenlipilumW.T.Wang)和松潘烏頭(AconitumsungpanenseHandMazz)中分離得到了:乙酸、糠醛、2-甲氧基苯酚、4-特丁基苯酚、2,3-二氫苯并呋喃、癸酸-2,3-二羥基丙酯、8-炔-硬脂酸甲酯等物質[9]。
......
參考文獻(略)

原文地址:http://www.411242.buzz/yaoxuelw/16311.html,如有轉載請標明出處,謝謝。

您可能在尋找藥學論文方面的范文,您可以移步到藥學論文頻道(http://www.411242.buzz/yaoxuelw/)查找


上一篇:龍血竭-β-環糊精包合物凝膠的藥效學研究
下一篇:牙膏用美洲大蠊提取物的化學成分研究
真人欢乐捕鱼官网